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N+注入誘變選育纖維素酶高產(chǎn)菌株及發(fā)酵產(chǎn)酶營養(yǎng)因子優(yōu)化研究

《生物質(zhì)化學(xué)工程》2014年4期
2014-08-05
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張寧,蔣劍春*,楊靜,衛(wèi)民,趙劍,童婭娟

(中國林業(yè)科學(xué)研究院 林產(chǎn)化學(xué)工業(yè)研究所; 生物質(zhì)化學(xué)利用國家工程實(shí)驗(yàn)室; 國家林業(yè)局 林產(chǎn)化學(xué)工程重點(diǎn)開放性實(shí)驗(yàn)室; 江蘇省 生物質(zhì)能源與材料重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,江蘇 南京 210042)

  摘 要:應(yīng)用低能氮離子(N+)注入技術(shù)對(duì)纖維素酶產(chǎn)生菌里氏木霉(Trichoderma reesei)進(jìn)行誘變選育,在能量為 10 keV,注量為150×1014和200×1014 N+/cm2的條件下分別篩選得到3株纖維素酶高產(chǎn)菌株,連續(xù)5代遺傳穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,所得到的高產(chǎn)菌株遺傳穩(wěn)定性較好,羧甲基纖維素酶活力均提高到3.300 IU/mL 以上,較出發(fā)菌株 (2.698 IU/mL) 提高了20.0%以上。采用Plackett-Burman實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)法和旋轉(zhuǎn)中心組合設(shè)計(jì)法系統(tǒng)地研究高產(chǎn)菌株 150-1-1 發(fā)酵營養(yǎng)因子組成,得到了纖維素酶產(chǎn)量隨葡萄糖、麩皮和微晶纖維素等營養(yǎng)因子的變化規(guī)律及相應(yīng)的響應(yīng)面分析圖。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,葡萄糖、麩皮和微晶纖維素濃度與纖維素酶活存在顯著的相關(guān)性,當(dāng)葡萄糖濃度為4.9 g/L,麩皮濃度為23.0 g/L,微晶纖維素濃度為7.7 g/L時(shí),150-1-1纖維素酶濾紙酶活力達(dá)到2.439 IU/mL,較優(yōu)化前 (2.000 IU/mL) 提高了22.0%。

  關(guān)鍵詞:N+離子注入;里氏木霉;纖維素酶

  中圖分類號(hào):TQ352;Q815 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):1673-5854(2014)04-0028-07


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